Этот метод более трудоемкий и затратный, но более точный.
Кроме этого, он является количественным, а также позволяет определить минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) конкретного антибиотика на тестируемый штамм. Осуществляется он следующим образом.
А. Готовятся серии (обычно 8) двойных разведений антибиотиков в питательной среде.
Б. Проводится засев сред с разведениями антибиотика тестируемым штаммом.
В. Посевы инкубируют в термостате необходимое для появления видимого роста время.
Г. Проводят учёт бактериостатической концентрации (МИК) антибиотика по отношению к тестируемому штамму (максимальное разведение, в котором еще не наблюдается рост тестируемого штамма).
Д. Производится высев из разведений, в которых не наблюдается рост тестируемых штаммов, на питательную среду без антибиотика.
Е. Посевы инкубируют в термостате необходимое для появления видимого роста время.
Ж. Проводится учёт бактерицидной концентрации (МБК) антибиотика по отношении к тестируемому штамму (максимальное разведение, высев из которого на питательную среду без антибиотика не дал роста).