Транскрипция происходит в три стадии:
1) инициация,
2) элонгация.
3) терминация.
Основным ферментом, осуществляющим транскрипцию, является РНК-полимераза. Так же, как и рибосомы, РНК-полимеразы бывают двух типов - прокариотические и эукариотические. РНК-полимераза прокариотического типа состоит из 5 субъединиц четырех видов (a, b, b' и s) и имеет состав a2bb's. Лучше всего изучена РНК-полимераза из Escherichia coli: мол. масса ее субъединиц составляет 40 кДа (a), 155 кДа (b), 160 кДа (b') и 85 кДа (s), фермент имеет несколько вытянутую форму и его максимальные размеры достигают 15 нм. a-, b- и b'-субъединицы разных видов бактерий имеют довольно близкую мол. массу, тогда как мол. масса s-субъединицы варьирует в значительных пределах - от 44 до 92 кДа. Полный фермент (голофермент) состава a2bb's нужен только для инициации транскрипции, а затем s-субъединица (s-фактор) освобождается из комплекса и элонгация осуществляется минимальным ферментом состава a2bb'. У многих бактерий один и тот же минимальный фермент может взаимодействовать с разными s-факторами, одновременно присутствующими в клетке, и тогда происходит инициация транскрипции только определенной группы генов, "обслуживаемых" данным s-фактором.
В некоторых случаях, например, при переходе бактерии к споруляции, блокируется синтез "обычного" и активируется синтез нового s-фактора. Это приводит к прекращению транскрипции одной группы генов и инициации транскрипции новой группы генов, т.е. к смене генетических программ в клетке. Общее количество РНК-полимераз, присутствующих в клетке Escherichia coli, оценивается как 7 тыс., в зависимости от русловий роста в синтезе РНК может быть занято одновременно от 2 до 5 тыс. молекул фермента. РНК-полимеразы, кодируемые геномом размножающихся в бактериальных клетках бактериофагов, устроены гораздо проще прокариотических РНК- полимераз и состоят всего лишь из одной полипептидной цепи, но могут инициировать транскрипцию только определенных генов. Следовательно, сложность прокариотической РНК-полимеразы, по крайней мере частично, отражает наличие множества сигналов контроля, на которые она должна отвечать.
В ядре эукариот одновременно присутствуют три разные РНК-полимеразы эукариотического типа. РНК-полимераза I локализована в ядрышках и ответственна за транскрипцію генов рРНК, на ее долю приходится 50 - 70% клеточного синтеза РНК. В остальной части ядра локализованы РНК-полимераза II, обеспечивающая синтез гетерогенной ядерной РНК (предшественников мРНК), и РНК-полимераза III, обеспе- чивающая синтез многих малых РНК и тРНК. На их долю приходится 20 - 40% и 10% общего клеточного синтеза РНК соответственно. Каждая из эукариотических РНК- полимераз представляет собой крупный белковый агрегат, состоящий из двух больших субъединиц (примерно 200 и 140 кДа) и из порядка 10 маленьких субъединиц, варьирующих по мол. массе от 10 до 90 кДа. Ядра высших эукариот содержат около 40000 молекул РНК-полимеразы II, примерно такое же число молекул РНК- полимеразы I и вдвое меньше молекул РНК-полимеразы III, причем точное количество этих ферментов варьирует в зависимости от скорости роста клетки. Кроме ядерных РНК-полимераз в эукариотической клетке есть свои собственные РНК-полимеразы в митохондриях и хлоропластах, от- носящиеся к прокариотическому типу. Хлоропласты имеют две разные РНК-полимеразы, одна из которых кодируется ядерным геномом, а другая - пластидным геномом: для транскрипции гена внутрипластидной РНК-полимеразы необходимо поступление в хлоропласт синтезированной в цитоплазме пластидной РНК-полимеразы ядерного кодирования.
Загрузка...