Основными методами исследования гистологических объектов и на сегодняшний день остаются световая и электронная микроскопия, которые широко применяются в клинической и экспериментальной практике. Их
подробное описание вы можете найти в целом ряде классических и современных пособий и учебников (например, Волкова О.В. и др., 1982, Афанасьев Ю.И. и др.., 1990, Дзержинский М.Е. и др.., 2006, 2010, 2011).
Главными методами гистологического анализа являются методы гистохимического исследования, которые являются, фактически, методами аналитической химии, адаптированными к условиям гистологической практики. По результатам проведенной на препарате химической реакции можно сделать вывод о наличии или отсутствии определенного вещества в составе клетки. Более того, селективность визуализации такого вещества, позволяет сделать и определенный количественный анализ.
Количественная оценка микроструктур является необходимым условием получения объект объективных данных об их состоянии в норме, при экспериментальных воздействиях и патологии. Главными количественными показателями микроструктур является морфометрические (число структур и их геометрические параметры) и денситометрические, отражающих концентрацию (оптическую плотность) химических веществ в микроструктурах. Для определения этих параметров применяют морфометрические и спектрофотометрические методы. Морфометрия включает совокупность приемов и методов определения геометрических характеристик исследовательских объектов-гистологических препаратов (срезов, мазков, отпечатков и т.п.) и микрофотографий. Измерение числа структур, их плоскостей, диаметров, периметров и других показателей осуществляют, например, с помощью специальных морфометрических сеток или окуляр-микрометра, которые вставляют в окуляр светового микроскопа.
С помощью метода микроспектрофотометрии можно определить химический состав, концентрацию и количество различных веществ, содержащихся в определенных структурах клеток и тканей. При микроспектрофотометрии измеряются изменения интенсивности света определенной длины волны, происходящие при ее прохождении через объект с разной оптической плотностью.
Широкое распространение в гистологической практике получил в последние десятилетия метод иммуногистохимии. Все вещества, в которых возможно получить антитела, можно обнаружить на непосредственно на препарате путем проведения на нем реакции антитело - вещество, в которой данное антитело получено (антиген): синтезированное антитело связывается на препарате со «своим» антигеном. Визуализируются связано антитело с помощью различных меток (флуорохромами, с последующей люминесцентной микроскопией; ферментов, с последующим гистохимическим выявлением последнего; электронноплотные вещества, применяемые при работе с электронным микроскопом и т.д.)
Учитывая высокий уровень чувствительности и специфичности данной реакции, ее можно применять как для качественного, так и для количественного анализа на световом и электронно-микроскопическом уровнях.
Даже краткий обзор методов гистологического анализа, позволяет заключить, что на сегодняшний день гистология имеет на вооружении широкий спектр разнообразных современных методов, позволяющих решать самые клинические и экспериментальные задачи.