Меченый антиген. Определение концентрации антигена в биологическом материале.
Меченый антиген смешивают со специфическими антителами в различных соотношениях, чтобы получить кривую связывания и определить количество антигена, необходимую для связывания всех антител. Выбирают такую концентрацию антигена, чтобы связывания антител находилось в линейном диапазоне кривой, как правило, 50% от насыщения.
Далее, смешав меченый антиген и антитела в таком соотношении, начинают добавлять немеченых антиген - получают кривую конкуренции связывания меченого антигена немеченых. Если теперь вместо немеченых антигена, добавить пробу, содержащую неизвестное количество антигена, по кривой конкуренции можно рассчитать, сколько антигена содержится в пробе.
В этом методе, так же, как и для определения kА, необходимо разделить меченый антиген, что связался с антителами, и свободный антиген. Для этого также используют преципитации или сорбционные подходы. Как правило, для этого используют радиоактивно меченый антиген.