Для характеристики роста культур in vitro в первую очередь определяют увеличение сырой массы (W-Wo). Таким же образом можно проводить учет результатов по массе сухого вещества.
Больше информации о характере роста культуры получают при определении числа клеток на единицу массы ткани. Подсчет клеток позволяет определить увеличение массы ткани происходит за счет деления клеток или их роста. Это дает возможность рассчитать и средний вес клетки. Количество клеток определяют по методу разработанному Брауном, который заключается в мацерации и последующем подсчете капли суспензии клеток в счетной камере под микроскопом. Используют несколько методов мацерации. Большинство из них базируется на обработке тканей сильными кислотами, которые гидролизуют срединные пластинки, соединяющие клетки.
Для суспензионных культур определяют объем уплотненных клеток. Для этого в градуированные центрифужные пробирки переносят определенный объем суспензии (15 - 30 мл) и центрифугируют при 1500g 10 мин или суспензию помещают в градуированный цилиндр и отстаивают в течение суток. Объем уплотненных клеток выражают в мл клеточного осадка на мл культуры.
Размер клеток определяют измеряя их длину и ширину под микроскопом с помощью шкалы окуляр-микрометра и объект микрометра.
Контрольные вопросы и задания
1. Что такое Калюс?
2. Какие изменения происходят в специализированный клетке при переходе к дедиференциации?
3. С каких органов растения можно получить каллусных ткань?
4. Какова основная особенность среды для калюсогенезу у злаков?
5. Назовите типы каллусных ткани.
6. Какое практическое использование рыхлых каллуса?
7. Какой тип каллусных ткани Вы бы использовали для получения растений-регенерантов?
8. Приведите примеры возможного использования каллусных ткани.
9. Что такое клеточная суспензия и какое ее практическое значение?
10. Каллусных ткани любого типа отдается предпочтение для получения клеточной суспензии?
11. Назовите методы культивирования одиночных клеток.
12. Какие показатели определяют для оценки роста суспензионной культуры?