Селекцию соматических гибридов осуществляют несколькими методами.
При механической изоляции используют морфологически различные типы родительских протопластов, после
слияния продукты соединенных протопластов обнаруживают визуально под микроскопом, изолируют микропипеткой и культивируют отдельно. Например при слиянии протопластов табака и моркови как селективные маркеры использовали зеленые хлоропласты табака и красно-оранжевые хромопласты моркови.
Вторым методом, который позволяет проводить отбор соматических гибридов, есть физиологическая комплементации - общая взаимодополняющая действие разных генов. Протопласты двух видов табака N. glauca и N. langsdorfii образовывали клеточные стенки, но не могли делиться и образовывать Калюс в среде Нагата и Такебе. В то же время протопласты гибрида делились и образовывали Калюс. Еще одной особенностью гибридного каллуса была способность расти на среде без гормонов, что позволило создать этот метод селекции.
Существуют и другие методы отбора соматических гибридов. Например: селекция по устойчивости к антибиотикам, гербицидов, аналогов аминокислот и т.д.
Использование изолированных протопластов не ограничивается возможностью получения соматических гибридов. Изолированные протопласты широко используют в клеточной селекции и генетической трансформации.
Контрольные вопросы и задания
1. Что такое изолированный протопласт?
2. Какие методы выделения изолированных протопластов?
3. Какие факторы влияют на жизнеспособность изолированных протопластов?
4. Почему в среде для выделения и культивирования изолированных протопластов обязательно добавлять осмотическое стабилизатор?
5. Какие вещества используют при выделении изолированных протопластов как осмотические стабилизаторы?
6. Какие ферменты используют для выделения изолированных протопластов?
7. Что обусловливает выбор состава ферментной смеси?
8. Из которого растительного материала можно выделять изолированные протопласты?
9. По каким методом проводят выделение изолированных протопластов? Охарактеризуйте его.
10. Как плотность высева изолированных протопластов влияет на их жизнеспособность?
11. Что такое соматическая гибридизация?
12. Какие существуют способы слияния изолированных протопластов?
13. Какие существуют способы отбора и идентификации соматических гибридов?
14. Какие соматические гибриды были получены методом слияния изолированных протопластов?