1. План.
2. Биология возбудителя холеры.
3. Антигенная строение.
4. Бровары.
5. Факторы патогенности. Механизм действия токсина.
6. Методы лабораторной диагностики.
В прошлом возникали опустошительные эпидемии и даже пандемии холеры. С 1817 по 1926г. было зарегистрировано 6 пандемий, во время которых погибли миллионы людей. Эти пандемии были вызваны классическим холерным вибрионом (Vibrio cholerae). С 1960-х годов распространяется 7-я пандемия холеры, возбудителем которой является вибрион Vibrio eltor, мало чем отличается от классического.
Подробно исследовал классический вибрион Р.Кох в 18833р, биовар Эль-Тор выделен от померлрго больного Ф. Готшлихом в 1906г.
Морфология. Холерные вибрионы - небольшие (1-3х0 ,2-0, 4 мкм) слегка изогнутые палочки, имеют вид комы, очень полиморфны. На искусственных питательных средах, особенно в старых культурах, они могут иметь вид слоев, зерен, нитей, спиралей. Холерные вибрионы очень подвижны монотрихи - их жгутик в несколько раз превышает длину клетки. Спор и капсул не образуют. Грамотрицательные. В окрашенных мазках располагаются в виде стаи рыб.
При электронной микроскопии установлено, что между стенкой и цитоплазмой находятся вакуоли. Считают, что в этих вакуолях синтезируется экзотоксин.
Классификация. Известны 2 биоваров: классический и Эль-Тор;
3 серовара холерного вибриона: Огава, Инаба, Гикошима.
Культивирование. Холерные вибрионы - строгие аэробы. К питательных сред неприхотливы. Лужнолюбни. Размножаются при температуре 37 - 39 ° С и рН 8-9. Хорошо растут на МПА и МПБ.
Элективные среды является щелочная 1% пептона вода. На поверхности этой среды они образуют нежную голубоватую пленку.
На щелочном агаре колонии небольшие круглые прозрачные с ровным краем, голубоватые.
На плотной среде ТCBS (тиосульфатцитратсахарозний агар с добавлением солей желчи) образуются колонии желтого цвета на фоне голубоватого среды. Размножаются быстро:
-В редких питательных средах 6-8 часов,
-На плотных - 12-14 часов.
Холерные вибрионы диссоциируют с S-в R-форму.
Ферментативные свойства. Холерные вибрионы биохимически активны. Они имеют сахаролитические, протеолитические и диастатични свойства.
Сахаролитические свойства выражены в расщеплении сахара до образования кислоты. Ферментация глюкозы, сахарозы, маннит, маннозы и отсутствие ферментации арабинозы является важным диагностическим признаком.
По расщеплением маннозы, сахарозы и арабинозы вибрионы делятся на группы по Хейбергу.
Холерные вибрионы относятся к I группе (расщепляют моноз и сахарозу но не расщепляют арабинозы).
Протеолитические свойства: холерные вибрионы разжижают желатина, раскладывают триптофан к образованию индола, продуцируют оксидазы, восстанавливают нитраты в нитриты, згортують молоко. Сероводород не образуют.
Холерные вибрионы имеют декарбоксилазы, которые помогают ферментировать в анаэробных условиях аминокислоты лизин, орнитин. НЕ ферментируется аминокислота аргинин.
Диастатични свойства выражаются в расщеплении растворимого крахмала.
Холерный вибрион продуцирует ферменты патогенности:
фибринолизин,
плазмокоагулаза,
гиалуронидазу,
лецитиназу,
коллагеназу и другие.
Токсинообразование. Холерные вибрионы продуйте токсины трех типов.
Токсин I типа - эндотоксин, выделяющиеся при разрушении микробной клетки, термостабильный (липополисахарида). Считают, что он способствует развитию антибактериального иммунитета.
Токсин II типа - экзотоксин (холероген) термолабильный, обладает энтеротоксигенными действием и играет важную роль в патогенезе холеры (усиливает функцию секреторных клеток тонкого кишечника, приводит к обезвоживанию организма).
Токсин III типа термостабильный, считают, что он подавляет активный транспорт натрия через эпителий кишечника.
Антигенная структура. Холерные вибрионы имеют термостабильный соматический 0-антиген и термолабильный Н-антиген.
Н-антиген - неспецифический и является общим для всего рода Vиbгио.
0-антиген имеет видовую и типовую специфичность. По 0-антигена холерные вибрионы делят на 54 группы.
Антигенная строение вибриона определяется в РА на стекле с О-1 холерной сывороткой и сыворотками Огава и Инаба, а также в развернутой РА в пробирках.
Устойчивость к факторам окружающей среды.
При температуре 60 ° С холерные вибрионы погибают в течение 5 минут, при кипячении - мгновенно. Низкие температуры они переносят хорошо. Во льду сохраняются несколько месяцев, в морской и летней воде - несколько недель. На влажной биилизни при отсутствии света вибрион сохраняется более 20 суток. К сушки и солнечного света холерные вибрионы очень чувствительны. Общепринятые концентрации дезинфицирующих средств убивают их быстро. Однако при работе с возбудителем холеры пользуются дезинфицирующий раствор большой концентрации. Холерные вибрионы чувствительны к кислотам (хлор водородной кислоты и другие). Вибрион холеры Эль-Тор более устойчив.
На классический биовар холерного вибриона действует бактериофагС, на биовар Эль-Тор-бактериофаг Эль-Тор.
Чувствительность животных. В обычных условиях животные не болеют холерой. В экспериментальных условиях внутричеревне введения холерных вибрионов кроликам и морским свинкам сопровождается выраженным токсикозом, который приводит к их гибели.
Источник инфекции и пути передачи. Единственным источником холеры является человек, выделяющий вибрионы холеры во внешнюю среду в период заболевания или носительства. При холере, вызванной вибрионом Эль-Тор, отмечается длительное носительство. Заражение человека происходит через продукты (овощи, фрукты), воду и другие объекты окружающей среды.
Патогенез. Заражение возникает через рот. Попав в желудок, часть холерных бактерий погибает в кислой среде желудка, а часть проникает в кишечник, где в щелочной среде при достаточном количестве продуктов распада белков способствуют их размножению и выделению экзотоксина - холерогену.
Заболевание возникает через 1-3 дня, иногда через 6 суток после заражения, заболевания характеризуется проявлениями общей интоксикации, болями в животе, рвотой и развитием диарейного синдрома. Для последнего характерно выделение значительного количества (до 10 л) жидких бесцветного стула ("рисовый отвар"). Это стадия гастрита или энтерита.
В тяжелом случае наступает стадия холерного алгид, которая характеризуется гиповолемией, нарушением електролитного баланса, при котором снижается артериальное давление, развивается почечная недостаточность, характерная афония, сердечная недостаточность, гипотермия и нарушения сознания. Летальность больных в алгидный стадии достигает 60%.
Лабораторная диагностика. Материал для исследования - испражнения, рвотные массы, желчь, секционный материал, белье, вода, гидробионты, пищевые продукты, смывы.
На I этапе материал засевают на первую 1% пептонную воду, щелочной агар и TCBS-агар.
II этап починаеься через 6-8 ч после начала исследования. Изучают рост на первой среде накопления и делают высев наа щелочной агар и на вторую 1% пептонную воду.
III этап (через 12-14 ч после начала исследования). Изучают рост на второй среде накопления; делают посев на щелочной агар.
С чашек отбирают не менее 5 колоний высевают на лактозо-сахарозная среду или с.Клиглера.
IV этапе (чере 18 24ч после начала исследования). Проверяют чистоту выделенной культуры и проводят биохимическую и серологическую идентификацию, цель которой-определение биоваров и серовару холерного вибриона (классический, Эль-Тор, Инаба, Огава, Гикошима).
Для экспресс-диагностики и идентификации используют РИФ, индикаторные бумажки (СИБ-1), РПГА, РП в геле, реакцию иммобилизации.
Иммунитет. Устойчивый, носит антимикробный и антитоксическое характер, связанный с наличием агглютининов, вибриолизинив,
антитоксина и других антител. Кроме того, в иммунитете значение придают факторам местной защиты.
Профилактика. Проведение совместных противоэпидемических мероприятий: ранее выявленных больных, изоляция и госпитализация, дезинфекция, обсервация, охрана источников воды, надзор за пищевыми продуктами, защита границ при эпидемических вспышках и другие.
Для специфической профилактики используют убитую холерную вакцину (холероген-анатоксин в сочетании с 0 антигеном холерного вибриона), ее эффективность не превышает 60-70%, она защищает от развития болезни в течение 3-6 месяцев.
Лечение включает восполнение потерянной жидкости и электролитов, проведение антибактериальной терапии препаратами тетрациклинового ряда.