План:
4. Морфология и биологические свойства бацилл сибирской язвы.
5. Патогенность для животных и людей.
6. Методы лабораторной диагностики. Дифференциация сибиреязвенных бацилл от антракоидов.
В России это заболевание получило название сибирской язвы в связи с эпидемией на Урале в 1786-1788 гг., Описанной С.С.Андриевским, который самозаражением доказал в 1788. инфекционную природу сибирской язвы и зоонозный характер ее росповсюдження.
Возбудитель сибирской язвы описали А. Поллендер в 1849г., К.Давен в 1850г. и Ф. Браула в 118854р. Учение о язвой было создано Р.Коха, Л. Пастером и Л.С. Ценковский.
Морфология. Бациллы сибирской язвы грамположительные, крупные стрептобациллы, 3-10 мкм в длину, и 1-1,5 мкм в ширину. Располагаются в организме парами или короткими цепочками, на питательных средах образуют долги цепочки. Концы бацилл в окраске препарате имеют вид рубленых или слегка вогнутых, напоминая бамбуковую палку с коленчатыми сочленениями. Бациллы сибирской язвы неподвижны, вне организма образуют споры овальной формы, расположены центральное, не превышая предшественник клетки, спорообразования наиболее интенсивное в присутствии кислорода и при и 30-400С. Оно теряется в организме человека и животных и не происходит при температуре свыше 430С и ниже 150С.
Доказано, что при благоприятных условиях в теплое время года споры могут переходить в вегетативные формы и с наступлением осени снова превращаются в споры.
В организме человека и животных бациллы сибирской язвы образуют капсулы окружающих как отдельные особи, так и те, которые расположены цепочками. Капсулы образуются и в том случае, когда бациллы растут на питательных середовищлх, содержащие кровь, сыворотку, яичный белок или ткань мазке. В капсуле есть специфический протеин. Бациллы сибирской язвы окрашиваются всеми анилиновыми красителями.
Культивирование. Возбудитель сибирской язвы аэробных и факультативный анаэроб, оптимальная температира роста 37-380С, крайние границы 12 и 450С, хорошо растут на обычных средах при рН 7,2-7,6.
На МПА образует шероховатые (R) колонии с неровными краями, напоминающие голову медузы или львиную гриву.
Гладкие S-формы слабковирулентни, не образуют капсул в организме. Потеря капсулы также сопровождается потерей вирулентности.
Когда бациллы сибирской язвы растут на МПБ, на дне пробирки или флакона появляется осадок, который напоминает пучок ваты, а бульон залишиеться прозрачным.
При переходе колонии с R в S-форму бациллы сибирской язвы теряют способного располагаться в мазках цепочками; образуются коккообразные, диплобацилярни формы или скопления бацилл. Культивирование при температуре 42,50 С обуславливает образование нитевидных слабковирулентних форм, не образуют спор. На МПА с пенициллином наблюдается распад бацилл на отдельные шарики, расположенные в виде ожерелья "жемчужное ожерелье".
Ферментативные свойства. Бациллы сибирской язвы содержат ферменты - дегидразы, липазу, амилазу, пероксидазу, каталазу.
При посеве столбиком в желатин бациллы растут в виде елочки, перевернутой вершиной вниз, причем желатин разжижается на отдельные слои. Бациллы сибирской язвы медленно разжижают свернувшуюся сыворотку, образуют аммиак, сероводород, постепенно восстанавливают нитраты и нитриты, зсидають и пентонизують молоко, ферментируют с образованием кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу и другие углеводы.
Токсинообразование. Возбудитель сибирской язвы при росте на полунасыщения среде выделяет в культурную жидкость протеиновый комплекс экзотоксина, содержащий:
-Летальный токсин,
-Отечный фактор
-И антиген, индуцирует продукцию неполных антител.
Антигенная структура. Бацилла сибирской язвы содержит капсульный (протеиновый) и соматический (полисахаридный) антигены.
Полисахаридный антиген является в клеточной стенке микроорганизма, протеиновый - в капсуле, которая приводит антифагацитарну активность.
Соматической полисахаридный антиген, состоящий из а-глюкозамина, галактозы и остатков уксусной кислоты, термостойкий. Против этого антигенного комплекса защитные антитела не вырабатываются. Он долго сохраняется в культурах, во внешней среде и на секционном материале.
На выявлении полисахаридного антигена основывается реакция термопреципитации (реакция Асколи). Полученный при кипячении зараженного материала сибиреязвенный экстракт содержит полисахаридную (термостойкую) фракцию, которая при взаимодействии с преципитирующих сывороткой приводит РП.
Капсула месит протеиноподибну вещество полипептид, в состав которой входит полиглутаминова кислота.
Возбудитель сибирской язвы в организме животных и на среде, содержащей экстракт ткани или плазму, производит особого рода (протективный) антиген, представляет собой антитоксическое термолабильный протеин с очень вираженной иммунизирующих свойством.
В бацилл сибирской язвы, антракоидов, псевдосибиркових бацилл спороутворних сапрофитов есть общий антиген - гаптен, который вызывает выработку неполных антител.
Резистентность. Бациллы сибирской язвы в запаянных ампулах сохраняются до 40, а споры до 65 лет, в сухом состоянии, а также в почве сохраняют жизнедеятельность в течение нескольких десятилетий, они устойчивы к действию дезрастворов.
Вегетативные формы при температуре 550 С погибают через 40 мин., При температуре 1000 С за 1-2 мин. Споры термостойкие, выдерживают кипьячиння течение 15-20 мин, при действии 1% раствора формалина и 10% раствора едкого натра разрушаются через 2 часа. При исследовании гниющих трупов животных можно довольно часто обнаружить пустые капсулы (тени) микроорганизмов, лишены цитоплазмы.
Патогенность для животных. С домашними животными в сибирской язвы восприимчивы овцы, коровы, лошади, олени, верблюды, свиньи. Животные чаще заражаются перорально поглощающие вместе с кормом споры возбудителей, место локализации бацилл - кишки. В ряде случаев заражения наступает через кровососущих комар (гедзии, мухи-жигалки).
С лабораторных животных наиболее благоприятные белые мыши, морские свинки, кролики, которые после заражения погибают на 2-4 сутки, на месте введения бацилл образуется отек, кровоизлияния; внутренние органы (особенно селезенка) застойные, увеличены, развивается септицемия. Вследствие антикоагулюючои действия бацилл сибирской язвы кровь погибших животных не свертывается, она густая, черно-красного цвета.
Патогенез заболевания человека. Сибирская язва - типичное зоонозное заболевания. Люди заражаются от больных животных, а также через предметы и изделия из инфицированных сырья (полушубки, меховые рукавицы, воротники, шапки, кисти для бритья), в летнее время заражение возможно при укусе кровососущих насекомых. Сибирская язва проявляется в трех основных клинических формах:
кожной,
легочной и
кишечной.
При кожной форме местом проникновения возбудителя является поврежденная кожа, главным образом открытых частей тела (лицо, кожа кисти рук, предплечья). В месте локализации возбудителя образуется сибиреязвенный карбункул. Болеют преимущественно люди, которые контактируют с больными животными и животной сырьем, заражена бациллами сибирской язвы, а также те, кто пользуется изделиями из меху животных пораженных сибирской язвой.
При легочной форме заражения наступает аэрогенным путем при работе с материалом, инфицированным спорами сибирской язвы. Заболевание имеет ход по типу тяжелой бронхопневмонии.
Кишечная форма сибирской язвы возникает в результате употребления в пищу мяса больных животных, при этом наблюдается очень тяжелое поражение слизистой оболочки кишечника с кровоизлияниями и очагами некроза. Бациллы выделяются с испражнениями.
Кожная форма сибирской язвы регистрируется спарадично, кишечная - очень редко, легочная форма в связи с осуществлением мероприятий по охране труда почти не случается.
В ослабленных те истощения людей, а также у больных с любой формой заболевания может развиться сибиреязвенным септицемия.
Иммунитет. При сибирской язве иммунитет антиинфекционной и зависит от наличия протективных антител, продуцируемых организмом в ответ на комплекс экзотоксина. Под влиянием Защитный антител вирулентные язвой бациллы обезвреживаются фагоцитарной реакцией. В сыворотке крови лиц, переболевших язвой, проявляющие вещества, способные разрушать капсульную субстанцию сибиреязвенных бацилл, нейтрализовать агрессины и токсины (летальный фактор).
Лабораторная диагностика. При кожной форме сибирской язвы исследуют экссудат карбункула, который берут из толщи отека на границе со здоровой тканью, при легочной - мокрота, при кишечной - испражнения и мочу, септицемии - кровь.
1. Патологический материал микроскопируют, мазки окрашивают по Граму и Романовскому - Гимзе. Выявление характерных что в морфологии капсульных бацилл, расположенных цепочками, позволяет поставить предварительный диагноз сибирской язвы.
2. Для выделения чистой культуры Исследуемые об объекты высевают на чашки с МПА и в пробирки МПБ. Затем по характеру роста, морфологии те биохимическими свойствами идентифицируют выделенную культуру с другими подобными по морфологии микроорганизмами. Для выявления капсулообразование применяют СЫВОРОТКА-кровяная среда.
3. Дополнительно рекомендуется применять люминисцентные-серологическую пробу и тест "жемчужного ожерелья" (выращивание культуры на среде с пеницелином).
4. Экспериментальные животные заражают патологическим материалом, а также выделенной из него чистой культурой. Возбудитель сибирской язвы вызывает смерть белых мышей через 24-48 часов, морских свинок - на 2-3-и сутки. В крови и во внутренних органах при бактериоскопии мазков обнаруживают бациллы сибирской язвы, окруженных капсулой.
Применяют также ускоренную биологическую пробу, которая заключается в следующем. Добытую культуру, требует идентификации, вводят в внутрибрюшное полость белым мышам и через несколько часов после заражения делают мазки из перетонеального содержимого.
Выявление в мазках типичных капсульных бацилл позволяет дать окончательный ответ о результатах биологической пробы.
5. В случае необходимости установить ретроспективный диагноз сибирской язвы в случаях с отрицательными результатом бактериоскопического и бактериологического исследования ставят аллергическую пробу.
6. Трупный материал, кожаную и меховую сырье, из которого трудно выделить бациллы сибирской язвы, подвергают серологическом исследованию с помощью реакции термопреципитации (реакция Асколи).
При лабораторной диагностике сибирской язвы нужно помнить о микроорганизмах, биологически близки к В.аnthracis, споровые аэробы, очень распространены в природе, В.сегеus, В.megaterium и др..
Для дифференциации бацилл сибирской язвы из антракоидов и другими подобными спороутровоючимы аэробами применяют фагодиагностику. Специфический фаг лизирует только культуры сибирской язвы.
Лечение. Комплексная терапия больных язвой направлена как против токсина, так и против бацилл и заключается в своевременном внутренне-мышечном введении противосибиреязвенных глобулина (30-50 мл) и антибиотиков (пенициллина, эритромицина, полусинтетических тетрациклинов).
Профилактика. Общие меры для предотвращения сибирской язвы осуществляют вместе с ветеринарной службой, к ним входят своевременное выявление, изоляция и лечение больных животных, старательная дезинфекция помещений, территории, на которой они были, и всех предметов, с которыми они контактировали, а также вспашки выпасов. Трупы животных, погибших от сибирской язвы, сжигают или закапывают в специально отведение мест (скотомогильнике) на глубину не менее 2 м и засыпают хлорной известью. Кроме того, ветеринарная служба обеспечивает меры: недопущение в пищу мяса животных, больных сибирской язвой, а также исполнительный контроль за выпуском на реализацию кожаных и меховых изделий из животного сырья.
Для специфической профилактики в нашей стране используют добытую с безкапсульних бацилл сибирской язвы вакцину СТИ, что является зависсю авирулентных живых спор вакцине штаммов, ее применяют для иммунизации как домашних животных, так и людей. В 1 мл вакцины, предназначенных для накожного применения, содержится 4 млрд микробных тел, вакцин для подкожного введения - 100 млн. Введение вакцины СТИ довольно быстро создает иммунитет длительностью более года. Вакцинируют людей, которые работают на предприятиях, где обрабатывают животное сырье, на мясокомбинатах, в колхозах и совхозах, где встречаются заболевания сибирской язвой.
Лицам, имевшим контакт с материалом, инфицированным бациллами сибирской язвы (при обработке туш и употребление в пищу мяса животных, пораженных сибирской язвой), ежедневно в течение 3-5 дней вводят внутримышечно 20-25мл противосибиреязвенных глобулина в сочетании с пеницелином.
В Англии применяют химическую сибиреязвенным вакцину, состоящую из протективного антигена (фильтрата безкапсульних непротеолитичних сибиреязвенных штаммов, выращенных на химических полусинтетических среды), в США для иммунизации людей используют антитоксин (токсоиды).
В нашей стране благодаря систематическим профилактическим мероприятиям ветеринарной и медицинской служб случаи заболевания сибирской язвой случаются очень редко.
К роду Васillus принадлежит i В.сеreus, которая может расти и размножаться в пищевых продуктах, продуцировать энтеротоксин, гемолизинов, ферменты патогенности и вызывать пищевые отравления у людей.