Возбудитель - Neisseria meningitidis входит в семью Neisseriaсеае, рода Neisseria. Материалом для исследования слизь из зева,
спинномозговая жидкость (СМР), кровь, гной, экссудат.
Менингококка очень чувствительны к колебаниям температуры, поэтому материал сразу же, не допуская охлаждения, отправляют в лабораторию.
Микробиологическую диагностика менингококковой инфекции проводят следующими методами: экспресс, микроскопическим, бактериологическим, серологическим.
Экспресс-метод. Для выявления возбудителя в материале, который исследуют используют реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) (см. Приложение).
Микроскопический метод. Мазки из осадка спинномозговой жидкости красят анилиновыми красками (водным раствором фуксина, метиленового синего). Препараты из навоза и слизи по Граму. Менингококка имеют форму подобную боба (бобовидную), располагаются попарно (диплококки) в цитоплазме лейкоцитов, грамотрицательные. Часто оказывается нежная капсула. При менингококцемии менингококка ищут под микроскопом в изготовленном препарате "грубой капли крови" Этот препарат не фиксируют. Его красят водным раствором метиленовой сини 2-3 минуты.
Бактериологический метод. СМР или ее осадок сеют на сывороточный бульон или агар, агар Хоттингера. Висел культивируют при температуре 37 ° С и повышенном содержании СО2. Менингококка образуют мелкие, круглые, выпуклые, прозрачные колонии. В мазках, изготовленных из колоний, ищут полиморфные диплококки и Тетракок. Колонии пересевают на скошенный сывороточный агар. На следующий день выделенную чистую культуру бактерий агглютинируются менингококковой сыворотками. С эпидемической целью определяют серовар менингококка. Сахаролитических активность менингококков определяют, выполняя посев на среду с лактозой, глюкозой, мальтозой, сахарозой, фруктозой. Менингококка ферментируют глюкозу и мальтозу с выделением кислоты. Чтобы установить принадлежащее бактериальной культуры к роду нейссерии ставят оксидазный реакцию. Для этого культуру, которую изучают наносят петлей на поверхность фильтровальной бумаги, смоченной реактивом (1% раствор тетраметилпарафенилен диамина) при положительной реакции следует от посева становится красным. Дифференциацию менингококков и непатогенных нейсерий проводят с учетом свойств последних расти на простых питательных средах и образовывать колонии при температуре 22 ° С.
Для выявления менингококков в крови во флаконы с 50 мл бульона, который содержит 0,1% агара, засевают 5-10 мл крови, стерильно взятой из вены. Через сутки делают пересел культуры на сывороточный агар. Выделение и идентификация культур осуществляется таким же образом, как и при исследовании СМР.
Серологический метод. Для выявления антител в сыворотке крови больных и переболевших применяют РПГА, РИФ (непрямой) и ИФА (см. Приложение), в которых в качестве антигенов используют группоспецифические полисахариды менингококка.